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常见问答

       依据国家法规,在专业的PCR实验(比如临床PCR检验实验室)室通常需要做到四区隔离(或至少是三区隔离)的要求。 
    一般常见的三区指的是: 
1、试剂配制区:PCR反应体系的配制区域。 
2、标本处理区:包括扩增模板的制备,也就是我们常常提取DNA的地方;3、PCR扩增和产物分析区:进行PCR扩增的区域,也是扩增产物进行凝胶电泳分析的区域。 

PCR实验室为什么要分区隔离

    如果将PCR扩增区域和产物分析区细分,那就是典型的四区隔离了。四区隔离,主要目的是防止气溶胶在各个PCR区域之间的流动,为了避免互相污染,可以针对不同区域设置正负压的方法: 
1.试剂配制区(Ⅰ区):最洁净的区域,保持微正压使得外界空气无法进入隔离污染源。并且阴性模板应该在此区加入PCR管并盖盖,严禁在此区域打开、存放装有DNA模板的离心管;
2.DNA模板添加区(Ⅱ区):保持微负压,保证内部空气不外泄,以免阳性模板的气溶胶对外界环境造成污染。
3.扩增及PCR产物分析区(Ⅲ区):保持微负压,使得内部空气不外泄,以免扩增产物的气溶胶对外界环境造成污染。
    在进入PCR实验室,需要在操作时遵循Ⅰ区→Ⅱ区→Ⅲ区单一方向进行,不可逆向进行。 不然可能会产生气溶胶污染,出现假阳性结果!所以PCR实验室在投入使用之前
,首先要经过国家授权的检测机构的检测,并且取得PCR实验室检测合格报告,然后彻底消毒以后,才能正常使用。



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